1. Syfte: Denna procedur syftar till att tillhandahålla en standardiserad procedur för aseptisk verksamhet och skydd av sterila rum.
2. Tillämpningsområde: biologiskt testlaboratorium
3. Ansvarig person: Kvalitetskontrollant
4. Definition: Ingen
5. Säkerhetsåtgärder
Utför strikt aseptiska åtgärder för att förhindra mikrobiell kontaminering; operatörer bör stänga av UV-lampan innan de går in i det sterila rummet.
6. Förfaranden
6.1. Det sterila rummet ska vara utrustat med ett sterilt operationsrum och ett buffertrum. Renligheten i det sterila operationsrummet ska uppnå klass 10000. Inomhustemperaturen ska hållas vid 20–24 °C och luftfuktigheten ska hållas vid 45–60 %. Renligheten i den rena arbetsbänken ska uppnå klass 100.
6.2. Sterila rum ska hållas rena, och det är strängt förbjudet att samla skräp för att förhindra kontaminering.
6.3. Förhindra strikt kontaminering av all steriliseringsutrustning och odlingsmedier. De som är kontaminerade bör sluta använda dem.
6.4. Sterilrummet ska vara utrustat med desinfektionsmedel med fungerande koncentration, såsom 5 % kresollösning, 70 % alkohol, 0,1 % klormetioninlösning etc.
6.5. Sterilrummet bör regelbundet steriliseras och rengöras med lämpligt desinfektionsmedel för att säkerställa att det sterila rummets renlighet uppfyller kraven.
6.6. Alla instrument, redskap, skålar och andra föremål som behöver föras in i sterilrummet ska vara tätt förpackade och steriliserade med lämpliga metoder.
6.7. Innan personalen går in i det sterila rummet måste hen tvätta händerna med tvål eller desinfektionsmedel och sedan byta till speciella arbetskläder, skor, hattar, masker och handskar i buffertrummet (eller torka händerna igen med 70 % etanol) innan hen går in i det sterila rummet. Utför operationerna i bakteriekammaren.
6.8. Innan det sterila rummet används måste ultravioletta lampan i det sterila rummet vara tänd för bestrålning och sterilisering i mer än 30 minuter, och den rena bänken måste vara tänd för luftblåsning samtidigt. Efter att operationen är avslutad bör det sterila rummet rengöras i tid och sedan steriliseras med ultraviolett ljus i 20 minuter.
6.9. Före inspektion ska den yttre förpackningen på testprovet hållas intakt och får inte öppnas för att förhindra kontaminering. Före inspektion, använd bomullstussar med 70 % alkohol för att desinficera den yttre ytan.
6.10. Under varje operation bör en negativ kontroll utföras för att kontrollera tillförlitligheten hos den aseptiska operationen.
6.11. När du absorberar bakterievätska måste du använda en sugboll för att absorbera den. Rör inte sugröret direkt med munnen.
6.12. Inokuleringsnålen måste steriliseras med låga före och efter varje användning. Efter kylning kan kulturen inokuleras.
6.13. Sugrör, provrör, petriskålar och andra redskap som innehåller bakterievätska ska blötläggas i en steriliseringshink med 5 % lysollösning för desinfektion och tas ut och sköljas efter 24 timmar.
6.14. Om bakterievätska spills på ett bord eller golv, häll omedelbart 5 % karbolsyralösning eller 3 % lysol på det kontaminerade området i minst 30 minuter innan behandling. När arbetskläder och hattar är kontaminerade med bakterievätska, ska de omedelbart tas av och tvättas efter högtrycksångsterilisering.
6.15. Alla föremål som innehåller levande bakterier måste desinficeras innan de sköljs under kranen. Det är strängt förbjudet att förorena avloppet.
6.16. Antalet kolonier i det sterila rummet bör kontrolleras varje månad. Med den rena bänken öppen, ta ett antal sterila petriskålar med en innerdiameter på 90 mm och injicera aseptiskt cirka 15 ml näringsagarodlingsmedium som har smälts och kylts till cirka 45 °C. Efter stelning, placera dem upp och ner vid 30 till 35 °C. Inkubera i 48 timmar i en inkubator på ℃. Efter att ha kontrollerat steriliteten, ta 3 till 5 plattor och placera dem till vänster, mitten och höger om arbetspositionen. Efter att ha öppnat locket och exponerat dem i 30 minuter, placera dem upp och ner i en inkubator på 30 till 35 °C i 48 timmar och ta ut dem. Undersök. Det genomsnittliga antalet diverse bakterier på plattan i ett rent område av klass 100 får inte överstiga 1 koloni, och det genomsnittliga antalet i ett renrum av klass 10 000 får inte överstiga 3 kolonier. Om gränsen överskrids bör det sterila rummet desinficeras noggrant tills upprepade inspektioner uppfyller kraven.
7. Se kapitlet (Sterilitetsinspektionsmetod) i "Läkemedelshygieniska inspektionsmetoder" och "Kinas standardpraxis för läkemedelsinspektion".
8. Distributionsavdelningen: Kvalitetsledningsavdelningen
Teknisk vägledning för renrum:
Efter att ha erhållit en steril miljö och sterila material måste vi upprätthålla ett sterilt tillstånd för att kunna studera en specifik känd mikroorganism eller utnyttja dess funktioner. Annars kan olika mikroorganismer utifrån lätt blandas in. Fenomenet med blandning av irrelevanta mikroorganismer utifrån kallas kontaminerande bakterier inom mikrobiologi. Att förhindra kontaminering är en kritisk teknik inom mikrobiologiskt arbete. Fullständig sterilisering å ena sidan och förebyggande av kontaminering å andra sidan är två aspekter av aseptisk teknik. Dessutom måste vi förhindra att de mikroorganismer som studeras, särskilt patogena mikroorganismer eller genetiskt modifierade mikroorganismer som inte existerar i naturen, slipper ut från våra experimentbehållare till den yttre miljön. För dessa ändamål finns det inom mikrobiologi många åtgärder.
Ett sterilt rum är vanligtvis ett litet rum som är speciellt inrett i ett mikrobiologiskt laboratorium. Det kan byggas med skivor och glas. Området bör inte vara för stort, cirka 4-5 kvadratmeter, och höjden bör vara cirka 2,5 meter. Ett buffertrum bör inrättas utanför sterilrummet. Dörren till buffertrummet och dörren till sterilrummet bör inte vara vända åt samma håll för att förhindra att luftflödet för in diverse bakterier. Både sterilrummet och buffertrummet måste vara lufttäta. Inomhusventilation måste ha luftfiltreringsanordningar. Golv och väggar i sterilrummet måste vara släta, svåra att hålla i sig smuts och lätta att rengöra. Arbetsytan bör vara jämn. Både sterilrummet och buffertrummet är utrustade med ultraviolett ljus. De ultravioletta ljusen i sterilrummet är placerade 1 meter från arbetsytan. Personal som kommer in i sterilrummet bör bära steriliserade kläder och hattar.
För närvarande används sterila rum främst i mikrobiologifabriker, medan vanliga laboratorier använder rena arbetsbänkar. Huvudfunktionen hos rena arbetsbänkar är att använda en laminär luftflödesanordning för att avlägsna diverse små dammpartiklar, inklusive mikroorganismer, från arbetsytan. Den elektriska anordningen låter luft passera genom ett HEPA-filter och sedan in i arbetsytan, så att arbetsytan alltid hålls under kontroll av den strömmande sterila luften. Dessutom finns det en höghastighetsluftridå på sidan nära utsidan för att förhindra att extern bakteriell luft tränger in.
På platser med svåra förhållanden kan även sterila trälådor användas istället för en ren arbetsbänk. Sterillådan har en enkel struktur och är lätt att flytta. Det finns två hål på lådans framsida, vilka blockeras med push-pull-dörrar när de inte är i drift. Du kan sträcka ut armarna under drift. Den övre delen av framsidan är försedd med glas för att underlätta intern drift. Det finns en ultraviolett lampa inuti lådan, och redskap och bakterier kan placeras genom en liten lucka på sidan.
Aseptiska operationstekniker spelar för närvarande inte bara en central roll inom mikrobiologisk forskning och tillämpningar, utan används också i stor utsträckning inom många biotekniker. Till exempel transgen teknik, monoklonal antikroppsteknik etc.
Publiceringstid: 6 mars 2024