1. Syfte: Denna procedur syftar till att tillhandahålla en standardiserad procedur för aseptisk operation och skydd av sterila rum.
2. Tillämpningsområde: Biologisk testlaboratorium
3. Ansvarig person: QC Supervisor Testare
5. Säkerhetsåtgärder
Strikt utföra aseptiska operationer för att förhindra mikrobiell förorening; Operatörer bör stänga av UV -lampan innan de går in i sterilt rum.
6. Procedures
6.1. Sterilt rum ska vara utrustat med ett sterilt operationrum och ett buffertrum. Renligheten i det sterila operationen bör nå klass 10000. Inomhustemperaturen bör hållas vid 20-24 ° C och fuktigheten bör hållas vid 45-60%. Renligheten i den rena bänken bör nå klass 100.
6.2. Sterilt rum bör hållas rent, och det är strikt förbjudet att höja skräp för att förhindra förorening.
6.3. Förhindrar strikt förorening av all steriliseringsutrustning och odlingsmedier. De som är förorenade bör sluta använda dem.
6.4. Sterilt rum ska vara utrustat med arbetskoncentration av desinfektionsmedel, såsom 5% cresollösning, 70% alkohol, 0,1% klormtioninlösning etc.
6.5. Sterilt rum bör regelbundet steriliseras och rengöras med lämpligt desinfektionsmedel för att säkerställa att sterila rumets renhet uppfyller kraven.
6.6. Alla instrument, instrument, rätter och andra föremål som måste föras in i sterilt rum bör tätt lindas och steriliseras med lämpliga metoder.
6.7. Innan du går in i sterilt rum måste personalen tvätta händerna med tvål eller desinfektionsmedel och sedan byta till speciella arbetskläder, skor, hattar, masker och handskar i buffertrummet (eller torka händerna igen med 70% etanol) innan de går in i sterilt rum. Utför operationer i bakteriekammaren.
6.8. Innan du använder sterilt rum måste den ultravioletta lampan i sterilt rum slås på för bestrålning och sterilisering i mer än 30 minuter, och den rena bänken måste slås på för luftblåsning samtidigt. After the operation is completed, sterile room should be cleaned in time and then sterilized by ultraviolet light for 20 minutes.
6.9. Innan inspektion bör den yttre förpackningen av testprovet hållas intakt och får inte öppnas för att förhindra förorening. Innan inspektion, använd 70% alkohol bomullsbollar för att desinficera ytterytan.
6.10. Under varje operation bör en negativ kontroll göras för att kontrollera tillförlitligheten för aseptisk drift.
6.11. När du absorberar bakteriell vätska måste du använda en sugboll för att absorbera den. Rör inte vid halmen direkt med munnen.
6.12. Inokuleringsnålen måste steriliseras av låga före och efter varje användning. Efter kylning kan kulturen ympas.
6.13. Strån, provrör, petriskålar och andra redskap som innehåller bakterievätska bör blötläggas i en steriliseringshink som innehåller 5% lysollösning för desinfektion och tas ut och sköljs efter 24 timmar.
6.14. Om det finns bakterievätska som spills på bord eller golv, bör du omedelbart hälla 5% karbolsyralösning eller 3% lysol på det förorenade området i minst 30 minuter innan du behandlar det. När arbetskläder och hattar är förorenade med bakteriell vätska, bör de tas av omedelbart och tvättas efter ångssterilisering av högt tryck.
6.15. Alla föremål som innehåller levande bakterier måste desinficeras innan de sköljs under kranen. Det är strikt förbjudet att förorena avloppet.
6.16. Antalet kolonier i sterilt rum bör kontrolleras varje månad. Med den rena bänken öppen, ta ett antal sterila petriskålar med en inre diameter på 90 mm och injicera aseptiskt cirka 15 ml näringsmordskulturmedium som har smälts och kylts till cirka 45 ° C. Efter stelning, placera den upp och ner vid 30 till 35 inkubat i 48 timmar i en ℃ inkubator. Efter att ha bevisat sterilitet, ta 3 till 5 plattor och placera dem till vänster, mitten och höger om arbetsläget. Efter att ha öppnat locket och utsatt dem i 30 minuter, placera dem upp och ner i en inkubator på 30 till 35 ° C i 48 timmar och ta ut dem. undersöka. Det genomsnittliga antalet diverse bakterier på plattan i ett rent område i klass 100 får inte överstiga 1 koloni, och det genomsnittliga antalet i ett klass 10000 rent rum får inte överstiga 3 kolonier. Om gränsen överskrids bör det sterila rummet desinficeras noggrant tills upprepade inspektioner uppfyller kraven.
7. Se kapitel (sterilitetsinspektionsmetod) i "Drug Hygienic Inspection Methods" och "China Standard Operation Praxis for Drug Inspection".
8. Distributionsavdelning: Kvalitetshanteringsavdelningen
Clean Room Technical Guidance:
Efter att ha erhållit en steril miljö och sterila material måste vi upprätthålla ett sterilt tillstånd för att studera en specifik känd mikroorganism eller använda deras funktioner. Annars kan olika mikroorganismer från utsidan lätt blandas in. Fenomenet med blandning av irrelevanta mikroorganismer från utsidan kallas förorenande bakterier i mikrobiologi. Att förhindra förorening är en kritisk teknik i mikrobiologiskt arbete. Fullständig sterilisering å ena sidan och förebyggande av förorening å andra sidan är två aspekter av aseptisk teknik. Dessutom måste vi förhindra mikroorganismer som studeras, särskilt patogena mikroorganismer eller genetiskt konstruerade mikroorganismer som inte finns i naturen, från att fly från våra experimentella behållare till yttre miljö. För dessa ändamål finns det i mikrobiologi många åtgärder.
Sterilt rum är vanligtvis ett litet rum speciellt inrättat i mikrobiologilaboratoriet. Kan byggas med lakan och glas. Området ska inte vara för stort, cirka 4-5 kvadratmeter, och höjden bör vara cirka 2,5 meter. Ett buffertrum ska ställas in utanför sterilt rum. Dörren till buffertrummet och dörren till det sterila rummet bör inte möta samma riktning för att förhindra att luftflödet tar in diverse bakterier. Både sterilt rum och buffertrum måste vara lufttäta. Inomhusventilationsutrustning måste ha luftfiltreringsanordningar. Golvet och väggarna i det sterila rummet måste vara smidigt, svårt att ha smuts och lätt att rengöra. Arbetsytan ska vara jämn. Både sterilt rum och buffertrum är utrustade med ultravioletta ljus. De ultravioletta lamporna i sterila rum ligger 1 meter från arbetsytan. Personal som kommer in i sterilt rum bör ha steriliserade kläder och hattar.
För närvarande finns sterila rum mestadels i mikrobiologiska fabriker, medan allmänna laboratorier använder ren bänk. Huvudfunktionen för den rena bänken är att använda laminär luftflödesanordning för att ta bort olika små damm inklusive mikroorganismer på arbetsytan. Den elektriska anordningen tillåter luft att passera genom HEPA -filter och sedan komma in i arbetsytan, så att arbetsytan alltid hålls under kontroll av flödande steril luft. Dessutom finns det en höghastighetsluftgardin på sidan nära utsidan för att förhindra att yttre bakterieluft kommer in.
På platser med svåra förhållanden kan trästerila lådor också användas istället för ren bänk. Den sterila lådan har en enkel struktur och är lätt att röra sig. Det finns två hål på framsidan av lådan, som blockeras av tryckdörrar när de inte är i drift. Du kan förlänga armarna under drift. Den övre delen av fronten är utrustad med glas för att underlätta intern drift. Det finns en ultraviolett lampa inuti rutan, och redskap och bakterier kan läggas in genom liten dörr på sidan.
Aseptiska driftstekniker spelar för närvarande inte bara en viktig roll i mikrobiologisk forskning och tillämpningar, utan används också allmänt i många biotekniker. Till exempel transgen teknik, monoklonal antikroppsteknologi etc.
Posttid: Mar-06-2024